কোষ সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টর কি? নীতিমালা, প্রকার এবং অ্যাপ্লিকেশন

মূল প্রশ্নের উত্তর:কোষ সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টর কী এবং এটি বায়োফার্মাসিউটিক্যাল উৎপাদনের জন্য উচ্চ ঘনত্বের জীবন্ত স্তন্যপায়ী কোষগুলিকে কীভাবে বজায় রাখে?একটি কোষ সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টর হল একটি বায়োরিঅ্যাক্টর যা বিশেষভাবে স্তন্যপায়ী কোষ (যেমন চীনা হ্যামস্টার ডিম্বাশয় [সিএইচও], এনএস0,অথবা HEK293 কোষ) অথবা পোকামাকড়ের কোষ সঠিকভাবে নিয়ন্ত্রিত তাপমাত্রা অবস্থার অধীনে (36.5°37.5°C), দ্রবীভূত অক্সিজেন (20°60% বায়ু স্যাচুরেশন), পিএইচ (6.8°7.4) এবং অস্মোল্যালিটি (280°340 mOsm/kg) ।কোষ সংস্কৃতির রিঅ্যাক্টরগুলিকে পর্যাপ্ত অক্সিজেন এবং পুষ্টি সরবরাহের সাথে সাথে কাটিয়া-প্ররোচিত কোষের ক্ষতি এড়াতে নরম মিশ্রণের শর্ত বজায় রাখতে হবে.

1সেল কালচার রিঅ্যাক্টরগুলির মূল অপারেটিং নীতি

·**নিম্ন কাঁচা মিশ্রণ নকশা**স্তন্যপায়ী কোষগুলির একটি শক্ত কোষ প্রাচীর নেই এবং 200 ¢ 300 ডাইন / সেমি 2 এর বেশি কাটানোর চাপ দ্বারা ক্ষতিগ্রস্থ হয়। কোষ সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টরগুলি বড় ব্যাসার্ধের ইম্পেলারগুলি ব্যবহার করে (ডি / টি অনুপাত 0.4 ¢ 0.) ।৬) কম গতিতে চলবে (২০-১৫০ rpm), সাধারণত অক্ষীয় প্রবাহের নকশা (সমুদ্রের ইম্পেলার, হাতির কানের ইম্পেলার) যা পর্যাপ্ত অক্সিজেন স্থানান্তর বজায় রেখে (কেএলএ 2 ¢ 15 এইচ -1 এর) 30 ¢ 100 এস -1 এর গড় কাটার হার তৈরি করে।

·** দ্রবীভূত অক্সিজেন নিয়ন্ত্রণ **স্তন্যপায়ী প্রাণীর কোষগুলি 0.5 ¢ 5 × 10−12 মোল / সেল / ঘন্টা হারে অক্সিজেন গ্রহণ করে। 10 ¢ 30 × 106 কোষ / এমএল কোষ ঘনত্বের ক্ষেত্রে, অক্সিজেনের চাহিদা 5 ¢ 50 এমএমএল / এল / ঘন্টা।অক্সিজেন স্পার্জিং (সরাসরি গ্যাস যোগ) দ্বারা সরবরাহ করা হয়, পৃষ্ঠ বায়ুচলাচল, বা ঝিল্লি ছড়িয়ে পড়া। ডিও একটি ক্যাসকেড নিয়ন্ত্রণ লুপ ব্যবহার করে বায়ু পরিপূর্ণতা 20 ০% 60% এ বজায় রাখা হয় যা গ্যাসের প্রবাহের হার এবং রচনা (বায়ু, O2, N2, CO2) সামঞ্জস্য করে।

·** পারফিউশন এবং সেল রিটেনশন **পারফিউশন সেল সংস্কৃতি একটি সেল রিটেনশন ডিভাইস (পরিবর্তনশীল ট্যাঞ্জেনশিয়াল ফ্লো [এটিএফ] ফিল্টার) ব্যবহার করে চুল্লির ভিতরে সেলগুলি ধরে রাখার সময় তাজা মিডিয়াকে অবিচ্ছিন্নভাবে খাওয়ায় এবং ব্যবহৃত মিডিয়া অপসারণ করে,স্পিন ফিল্টারএটি একটি ছোট চুল্লি ফুটপ্রিন্টের মধ্যে 10x উচ্চতর ভলিউমেট্রিক উত্পাদনশীলতা সক্ষম করে 50 ′′ 200 × 106 সেল / এমএল 10 ′′ 50x উচ্চতর কোষ ঘনত্ব অর্জন করে।

2. সেল কালচার রিঅ্যাক্টরের প্রধান প্রকার

·**স্টিয়ারড ট্যাংক সেল কালচার বায়োরেক্টর**স্টেইনলেস স্টীল (316L) বা একক ব্যবহারের ব্যাগ সিস্টেম (50~2,000 L) একটি নীচে মাউন্ট করা চৌম্বকীয় বা যান্ত্রিক agitator সঙ্গে। ক্লিনিকাল এবং বাণিজ্যিক বায়োফার্মাসিউটিক্যাল উত্পাদন জন্য শিল্প মান।মাল্টি-প্যারামিটার কন্ট্রোল (DO) দিয়ে সজ্জিত, পিএইচ, তাপমাত্রা, গ্লুকোজ / ল্যাকটেট বিশ্লেষক) এবং সিআইপি / এসআইপি ক্ষমতা (স্টেইনলেস স্টিলের জন্য) বা গামা-ইরেডিয়েটেড ব্যাগ (একবার ব্যবহারের জন্য) ।

·**ওয়েভ-মিশ্র সেল কালচার বায়োরেক্টর**একটি নমনীয় ব্যাগ একটি ঝাঁকুনি প্ল্যাটফর্মের উপর যা ইম্পেলার ছাড়াই তরঙ্গ-প্ররোচিত মিশ্রণ এবং বায়ুচলাচল উৎপন্ন করে। নরম গতি (জোড়ানো কোণ 6 ̊10 °,ফ্রিকোয়েন্সি 15 ¢ 35 rpm) কম shear চাপ (50 ¢ 150 s−1) সৃষ্টি করে, কাটিয়া-সংবেদনশীল কোষ এবং কম ঘনত্বের সংস্কৃতির জন্য আদর্শ। 10 এমএল থেকে 600 লিটার পর্যন্ত ভলিউম, মূলত বীজ ট্রেন সম্প্রসারণ এবং প্রাথমিক পর্যায়ে বিকাশের জন্য ব্যবহৃত হয়।

·** ফাঁকা ফাইবার সেল সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টর **হাজার হাজার অর্ধ-পরিবাহী ফাঁকা ফাইবার (পোর আকার ০.২ মাইক্রোমিটার, পৃষ্ঠের আয়তন ১.১০ মিটার) ধারণকারী একটি কার্টিজ।ফাইবার লুমেনের মধ্য দিয়ে মিডিয়া প্রবাহিত হওয়ার সময় কোষগুলি 1 ′′ 5 × 108 কোষ / এমএল পর্যন্ত ঘনত্বের সাথে শেলের পাশে বৃদ্ধি পায়, পুষ্টি সরবরাহ এবং বর্জ্য অপসারণ। দীর্ঘমেয়াদী (30 ′′ 60 দিন) অবিচ্ছিন্ন উত্পাদন জন্য ব্যবহৃত হয় অল্প পরিমাণে একক ক্লোনাল অ্যান্টিবডি এবং পুনর্মিলিত প্রোটিন।

সেল কালচার রিঅ্যাক্টর প্রকার তুলনা ম্যাট্রিক্স

প্রায়শই জিজ্ঞাসিত প্রশ্নাবলী (FAQ)

মাইক্রোবীয় ফার্মেটরগুলির তুলনায় কোষের সংস্কৃতির রিঅ্যাক্টরগুলিকে কম কাটিয়া চাপে কেন কাজ করতে হবে?

স্তন্যপায়ী কোষগুলির একটি শক্ত পেপটিডোগ্লাইকান কোষ প্রাচীর নেই, যা তাদের ইমপেলার টিপস, গ্যাস বুদবুদ ফাটল এবং তরল ঘূর্ণিঝড় থেকে কাটিয়া ক্ষতির জন্য সংবেদনশীল করে তোলে।200 ¢ 300 ডাইন / সেমি 2 এর উপরে কাটিয়া স্ট্রেসগুলি কোষ ঝিল্লি ভেঙে যায় এবং ইনট্রা সেলুলার এনজাইম মুক্তি দেয়মাইক্রোবীয় কোষ (ব্যাকটেরিয়া, খামির) 10×100x উচ্চতর কাটা সহ্য করে কারণ তাদের কোষ প্রাচীর কাঠামোগত অনমনীয়তা প্রদান করে।

পারফিউশন সেল কালচার কী এবং এটি কীভাবে ফিড-ব্যাচ থেকে আলাদা?

ফিড-ল্যাচ সংস্কৃতিতে, পুষ্টি উপাদানগুলি পর্যায়ক্রমে যোগ করা হয় যখন ল্যাচটি ফসল পর্যন্ত (সাধারণত 10 ¢ 14 দিন) রিঅ্যাক্টরটিতে থাকে, 10 ¢ 30 × 106 কোষ / এমএল কোষ ঘনত্ব অর্জন করে।পারফিউশন সংস্কৃতিতে, তাজা মিডিয়া ক্রমাগত খাওয়ানো হয় যখন ব্যবহৃত মিডিয়া ক্রমাগত অপসারণ করা হয় এবং কোষগুলি একটি ফিল্টার বা বসতি স্থাপন ডিভাইস দ্বারা ধরে রাখা হয়,৫১০ গুণ বেশি ভলিউম্যাট্রিক উৎপাদনশীলতার সাথে ৩০-৬০ দিনের জন্য ৫০-২০০ × ১০৬ টি কোষ/এমএল কোষ ঘনত্ব বজায় রাখা.

স্তন্যপায়ী প্রাণীর কোষের চাষের জন্য কেএলএর প্রয়োজনীয়তা কত?

কোষের ঘনত্ব এবং বিপাকীয় ক্রিয়াকলাপের উপর নির্ভর করে স্তন্যপায়ী কোষগুলির 2 ¢ 15 h-1 এর অক্সিজেন স্থানান্তর হার (কেএলএ) প্রয়োজন।এটি মাইক্রোবায়াল ফার্মেটেশনের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম (kLa 50 ¢ 300 h−1) কারণ স্তন্যপায়ী কোষগুলির স্বতন্ত্র অক্সিজেন শোষণের হার কম (0.5·5 × 10−12 মোল/সেল/ঘন্টা বনাম 10·100 × 10−12 মোল/সেল/ঘন্টা ব্যাকটেরিয়ার জন্য) ।

ভাইরাল ভ্যাকসিন উৎপাদনের জন্য কোষ সংস্কৃতি রিঅ্যাক্টর ব্যবহার করা যেতে পারে?

হ্যাঁ, ভাইরাল ভ্যাকসিন উৎপাদনের জন্য স্ট্যান্ডার্ড প্ল্যাটফর্ম হ'ল মিশ্রিত ট্যাঙ্ক বায়োরেক্টর (50 ₹2,000 লিটার) এ চাষ করা স্তন্যপায়ী কোষ (ভেরো, এমডিসিকে, এইচইকে 293) । কোষগুলি ভাইরাস (গ্রিপ,পোলিওসংক্রমণের পরে (৩৭ দিন), ভাইরাসটি সংগ্রহ করা হয়, বিশুদ্ধ করা হয় এবং নিষ্ক্রিয় করা হয়।বায়োসিকিউরিটি সীমাবদ্ধতার প্রয়োজনীয়তার কারণে একক ব্যবহারের চুল্লিগুলি এই অ্যাপ্লিকেশনটিতে আধিপত্য বিস্তার করে.